Dalam rangka mengembangkan Politeknik Kesehatan Depkes Semarang dan berpartisipasi dalam pembangunan dibidang pelayanan kesehatan, maka perlu menambah jurusan baru, yang diawali pelaksanaan studi kelayakan Diploma III Analis Kesehatan dengan menganalisis kebutuhan meliputi ketersediaan sarana, prasarana dan Sumber Daya Manusia (SDM). selanjutnya mengadakan studi banding ke Jurusan Analis Kesehatan yang ada lebih dulu di Semarang, Jawa Tengah.
Tahun 2009 di lokasi Kampus 3 Pedurungan dengan luas tanah 24.629 m2 didirikan Jurusan Analis Kesehatan dan bergabung satu lokasi dengan Jurusan Gizi, berdasarkan Surat Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia nomor HK.03.05//I/II/4/1715.1/2009 tanggal 1 April 2009 sebagai salah satu jurusan di Politeknik Kesehatan Depkes Semarang dengan nama Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Depkes Semarang.
Tahun 2010 berdasarkan surat dari Sekretariat Jenderal Kementerian Kesehatan RI, Nomor TU: 05.02/II/II/1535/2010 tanggal 18 Pebruari 2010 tentang Perubahan Nomenklatur Departemen Kesehatan RI menjadi Kementerian Kesehatan RI, maka Politeknik Kesehatan Depkes Semarang berubah menjadi Politeknik Kesehatan Kemenkes Semarang. Perubahan nomenklatur tersebut juga berlaku untuk semua jurusan dan program studi di lingkungan Poltekkes Kemenkes Semarang, sehingga Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Depkes Semarang berubah menjadi Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Semarang.
Tahun 2011 memperoleh Akreditasi B JENJANG AKREDITASI INSTITUSI PENDIDIKAN TENAGA KESEHATAN dari Departemen Kesehatan RI – (Piagam 4 Mei 2011)
Tahun 2012 meluluskan angkatan pertama sebanyak 47 mahasiswa
Tahun 2013 meluluskan angkatan kedua sebanyak 48 mahasiswa
Tahun 2014 memperoleh Akreditasi dengan peringkat B dari BAN-PT (Badan Akreditasi Nasional Perguruan Tinggi). Sertifikat 23 Mei 2014. Pada tahun ini kami meluluskan angkatan ketiga sebanyak 79 mahasiswa
Tahun 2015 bulan Mei menempati gedung baru yang beralamat di Jalan Wolter Monginsidi 115 Pedurungan Tengah, Pedurungan Semarang. Pada tahun ini kami meluluskan angkatan keempat sebanyak 79 mahasiswa
Tahun 2016 meluluskan angkatan kelima sebanyak 76 mahasiswa
Tahun 2017 meluluskan angkatan keenam sebanyak 82 mahasiswa
Pada tahun 2018 Poltekkes Kemenkes Semarang membuka program studi baru yang bergabung dalam Jurusan Analis Kesehatan yaitu Program Studi D-III Teknologi Bank Darah dan Sarjana Terapan Teknologi Labratorium Medis. Program Studi D-III Analis Kesehatan meluluskan angkatan ketujuh sebanyak 84 mahasiswa.